一、適用范圍
熒光探針法PCR試劑盒主要用于DNA分子的擴增和檢測,適用于醫學、生物學、環保、食品安全等領域的基因檢測和研究。
二、試劑盒組分
本試劑盒包括:TaqDNAPolymerase、核酸引物混合液、熒光探針、混合實時PCRbuffer、雜交探針引物等多種成分。
三、試劑盒儲存條件
試劑盒應存放于4℃環境中,不可凍結,避免光照和日曬。
四、操作步驟
1、從樣本中提取DNA并加入PCR反應管;
2、加入試劑盒中的TaqDNAPolymerase,核酸引物混合液和熒光探針;
3、加入混合實時PCRbuffer并充分混合;
4、進行PCR擴增,并進行實時熒光檢測;
5、數據分析。
五、注意事項
1、試劑盒使用前應充分搖勻;
2、反應體系中不能有任何雜質;
3、PCR擴增過程中應嚴格控制反應溫度和時間,確保擴增效果;
4、在檢測結果中,若目標物對應熒光探針的熒光值高于負對照熒光值,則可認為該樣本中存在目標物。
六、實驗結果的解釋
若PCR擴增后,熒光信號強度大于背景噪聲,則說明目標物存在,反之則說明不存在。根據樣品的熒光信號,可以通過計算閾值來判斷目標物的數量。
七、質量控制措施
為確保試劑盒質量,本試劑盒的生產過程中進行了多項質量控制措施。例如在成分篩選、產品生產和包裝過程中不斷監測,確保每一批次的產品品質穩定可靠。同時,每批產品在發貨前還會進行校準和功能測試,確保滿足客戶需求。
八、檢測限定及注意事項
為確保檢測準確度,建議在每次檢測前使用模板對反應體系進行質控。另外,在樣品處理、試劑配置、反應條件控制等步驟中均需注意無菌操作,盡可能排除外源性污染。