培養基是適于細菌生長繁殖需要的各種營養物質人工配制而成的基質。按營養成分和用途不同,分為基礎、合成、營養、鑒別、選擇和厭氧培養基。按物理形態分為固體、半固體和液體三類。根據細菌的種類和培養目的不同,可采用不同的培養基。
培養基常用的滅菌方法主要是濕熱滅菌和過濾除菌。
1、濕熱滅菌:
蒸汽在冷凝時釋放出大量潛能,并且蒸汽具有強大穿透力,蒸汽的濕熱破壞菌體蛋白質和核酸的化學鍵,使酶失活,微生物因代謝障礙而死亡。濕熱滅菌的效果,取決于致死溫度和致死時間。致死溫度是殺滅微生物的極限溫度。致死時間是在致死溫度下殺滅全部微生物所需時間。
高壓蒸汽滅菌適合于耐高溫培養基、接種器械和蒸餾水的滅菌。分裝后應立即滅菌,應在當天內完成滅菌工作,不可過夜。消毒時間不宜過長,也不能超過規定的壓力范圍,否則有機物質就會在高溫下分解,失去營養作用,也會使培養基變質、變色,甚至難以凝固。
2、過濾除菌:
一些抗生素及有機物等,遇熱容易分解,不能與培養基一起進行高溫滅菌,而要使用細菌過濾器濾去其中的雜菌,例如含抗生素的沙氏葡萄糖瓊脂培養基。過濾后的溶液要立即加入培養基中,若為液體培養基,可在冷卻至30℃時加入;若為固體培養基,必須在凝固之前(50-60℃)加入,振蕩使溶液與其他成分混合均勻。