豬乙型腦炎病毒抗體快速檢測(cè)卡?
乙型腦炎病毒(Japanese B encephalitis virus, JBEV)是一種危害嚴(yán)重的人獸共患病毒,對(duì)人類健康和畜牧業(yè)發(fā)展都會(huì)造成極大威脅。及時(shí)檢測(cè)對(duì)于預(yù)防和控制感染有重要意義。
實(shí)驗(yàn)原理:采用滲濾式免疫膠體金技術(shù),利用金顆粒作為示蹤劑,選擇性捕捉標(biāo)本中特異性抗體。斑點(diǎn)反應(yīng)板上的固相抗原特異地與標(biāo)本中的特異性抗體結(jié)合形成復(fù)合物,膠體金標(biāo)記的第二抗體(IgG、IgM、IgA)再與復(fù)合物結(jié)合,形成肉眼可見的紅色線條。
【樣品處理】
1. 取一定量的去脂肪組織樣本,用剪刀剪碎;
2. 稱取 2g 剪碎樣本于 50 ml 離心管中,并加入 4ml 去離 子水, 0.5ml 1M 鹽酸 , 0.1ml 樣 本衍生化試劑 1,,0.1ml 衍生化試劑 2,充分混合 3min;
3. 60℃水浴條件下孵育 1h;
4. 取出后加入 5ml 0.1M 磷酸氫二鉀,0.4ml 1M 氫氧化 鈉,倒入一瓶提取劑,充分混合 1min ,4000 轉(zhuǎn)/分鐘,離心 5min;
5. 移取上層溶液 3ml 于 5ml 離心管中,60℃下空氣吹 干;
6. 向吹干的試管中加入 1ml 凈化劑,加蓋振蕩 1min,然 后加入 0.5ml 復(fù)溶液,充分混勻,4000 轉(zhuǎn)/分鐘,離心1min(或靜置至明顯分層);
7. 吸取 0.1 毫升下層溶液,待檢;
氯霉素檢測(cè)試劑盒(酶免) |
鏈霉素檢測(cè)試劑盒(酶免) |
喹諾酮類檢測(cè)試劑盒(酶免) |
黃曲霉毒素M1檢測(cè)試劑盒(酶免) |
三聚氰胺檢測(cè)試劑盒(酶免) |
【使用步驟】 在進(jìn)行測(cè)試前先完整閱讀使用說(shuō)明書,使用前將試劑板和待檢樣本溶液恢復(fù)至室溫(20℃~30℃)。
1.從原包裝袋中取出試劑板,水平放置于觀察者正面, 如上圖右側(cè)所示(打開后請(qǐng)立即使用);
2.吸取待檢樣品溶液 100 微升于金標(biāo)微孔中,用小滴管 吹打*溶解孔內(nèi)紅色物質(zhì),等待反應(yīng) 5 分鐘;
3.吸取孔內(nèi)所有溶液滴加到加樣孔(見上圖)中,加樣 后開始計(jì)時(shí);
4. 結(jié)果應(yīng)在 5~8 分鐘讀取,其他時(shí)間判讀無(wú)效。
【結(jié)果判斷】
1. 陰性(-): T 線顯色(檢測(cè)線,靠近加樣孔一端)比 C 線(對(duì)照線)深或一樣深,表示樣品中呋 喃它
酮代謝物濃度低于檢測(cè)限或不含呋喃它酮 代謝物。
2. 陽(yáng)性(+): T 線顯色比 C 線淺,或 T 線無(wú)顯色,表示樣品中呋喃它酮代謝物殘留濃度高于檢測(cè)限,T 線顯色比 C 線越淺,表示樣品中呋喃它 酮代謝物殘留濃度越高。
3.無(wú)效:未出現(xiàn) C 線,可能是操作不當(dāng)或試劑板已失 效。應(yīng)再次閱讀說(shuō)明書,并用新的試劑板重新 測(cè)試。代謝物濃度低于檢測(cè)限或不含呋喃它酮 代謝物。
4. 陽(yáng)性(+): T 線顯色比 C 線淺,或 T 線無(wú)顯色,表示樣品中呋喃它酮代謝物殘留濃度高于檢測(cè)限,T 線顯色比 C 線越淺,表示樣品中呋喃它 酮代謝物殘留濃度越高。
5.無(wú)效:未出現(xiàn) C 線,可能是操作不當(dāng)或試劑板已失 效。應(yīng)再次閱讀說(shuō)明書,并用新的試劑板重新測(cè)試。
組織檢測(cè)步驟:
1、將樣本魚蝦蟹、畜禽肉、內(nèi)臟等去皮去脂肪,用均質(zhì)器均質(zhì)樣本,稱取3±0.05g均質(zhì)物至15ml離心管中。
2、依次加入4ml蒸餾水、0.5ml試劑A和0.6ml衍生化試劑,振蕩混勻,在65℃水浴中孵育30min。
3、依次加入1ml試劑B、0.4ml試劑C和1瓶提取劑(4ml),振蕩混勻。
4、在室溫下(20-25℃)4000r/min離心5min,取2ml上層有機(jī)相至5ml離心管中,在50-60℃水浴中用氮?dú)猓ɑ蚬咎峁┑目諝獯蹈蓛x)吹干。
5、取1ml凈化劑溶解干燥物,再加入0.5ml試劑D振蕩混勻,在室溫下(20-25℃)4000r/min離心2min,待檢。
?如使用全血標(biāo)本檢測(cè),標(biāo)本的移動(dòng)速度可能較慢,必要時(shí)可在加樣約1分鐘后,在加樣孔內(nèi)滴加1滴PBS作輔助液,以促進(jìn)標(biāo)本移動(dòng)。
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恩諾沙星檢測(cè)試劑盒(酶免) |
碘鹽檢測(cè)試劑 |