病毒DNA/RNA核酸提取試劑盒
(吸附柱法)
【產(chǎn)品名稱】
通用名 :病毒DNA/RNA核酸提取試劑盒(吸附柱法)
Name :Virus DNA/RNA Extraction Kit(Adsorption column method)
【產(chǎn)品介紹】
本試劑盒可以從多種樣本中提取DNA/RNA,包括血清、血漿、動物組織、體液等。處理的樣本通過加入裂解液后,把混合物移至吸附柱中,之后可以通過洗滌、洗脫,即可分離出病毒DNA/RNA。
本試劑盒提取的核酸可以用于Real-time PCR,Northern Blot,Blotting Hybridization ,cDNA library Construction等實(shí)驗(yàn)。
【技術(shù)信息】
方法 | 耗時 | 大體積 | 吸附率 |
吸附柱法 | 7-15分鐘 | 750μL | ≥90% |
樣本類型 | 樣本需求量 |
血清、血漿 | 200μL |
組織勻?qū)⑸锨逡?/span> | 200μL |
腹水等 | 1-10 mL |
培養(yǎng)的細(xì)胞 | ≥2×106個 |
【試劑組成】
名 稱 | 規(guī)格 |
裂解液 | 25mL |
去蛋白漂洗液 | 18mL(使用前加入12mL無水乙醇) |
洗滌液 | 12mL(使用前加入48mL無水乙醇) |
洗脫液 | 10mL |
吸附柱 | 50個 |
使用說明書 | 1份 |
【試劑規(guī)格】50T/盒。
【儲存運(yùn)輸】
室溫保存,有效期12個月??墒覝叵逻\(yùn)輸。
【自備材料】
滅菌的1.5mL離心管、各種規(guī)格滅菌的槍頭、離心機(jī)(大轉(zhuǎn)速≥14000rpm)、無水乙醇、漩渦混合器等。
【檢測方法】
動物、植物組織:將樣本用生理鹽水或PBS緩沖液充分研磨,離心取上清后進(jìn)行樣本提取操作。
血清、血漿、體液等樣本:直接進(jìn)行樣本提取操作(不足200μL,可以加入PBS緩沖液或者生理鹽水補(bǔ)足200μL)。
1.取200μL處理好的樣本(不足200μL,可以加入PBS緩沖液或者生理鹽水補(bǔ)足200μL),加入500μL裂解液,振蕩30秒,室溫靜止2分鐘。注:針對難裂解樣本,室溫靜置時間可延長至5分鐘。
2.把上述混合液轉(zhuǎn)移到吸附柱中(吸附柱要套上收集管,吸取液體時盡量不要吸到懸浮雜質(zhì),以免阻塞吸附膜),10000rpm離心1分鐘,棄去套管中液體。
3.向吸附柱中加入500μL去蛋白漂洗液,12000rpm離心30秒,棄去套管中液體。
4.向吸附柱中加入500μL 洗滌液,12000rpm離心30秒,棄去套管中液體。
5.向吸附柱中加入500μL 洗滌液,12000rpm離心30秒,棄去套管中液體。
6. 12000rpm再次離心2分鐘。
7.把吸附柱轉(zhuǎn)移至新的1.5mL滅菌離心管中,向吸附柱中加入 50μL洗脫液,并于室溫溫育2分鐘。
8.12000rpm離心1分鐘,棄去吸附柱,1.5mL滅菌離心管中液體即為DNA/RNA溶液。提取的DNA/RNA可直接用于各種下游應(yīng)用試驗(yàn),如不立即使用,請于-80℃保存。
【注意事項】
1.如果有冷凍離心機(jī),在4℃進(jìn)行離心。
2.請穿戴手套,用DEPC水浸泡所有的槍頭和離心管以保證不含有RNA酶,如果條件允許,請在超凈工作臺進(jìn)行。
3.使用前請檢查裂解液中是否有結(jié)晶,如果由于溫度過低導(dǎo)致溶液結(jié)晶,請將裂解液置于56℃溫浴,使結(jié)晶*溶解后再使用。
4.去蛋白漂洗液、洗滌液請按照說明書加入無水乙醇。